人源化小鼠模型，为乳糜泻药物研发搭建“镜像”桥梁 | 热心肠日报

研究的核心目标并非发现新靶点，而是验证一个预测性动物模型的可靠性。研究团队选择了一种已展现出临床获益的高选择性口服TG2抑制剂ZED1227作为工具分子。在前期的一项2期临床试验中，ZED1227已被证实能保护乳糜泻患者免受麸质诱导的肠道黏膜损伤。本研究的关键在于，将ZED1227应用于经过改良的NOD-DQ8小鼠模型，并系统比对其在动物体内与人类患者活检组织中引发的组织学与免疫转录组学改变，从而评估该模型是否能真实“复刻”人体内的药物疗效。

这种NOD-DQ8小鼠的特殊之处在于，它被敲除了自身的小鼠MHC-II分子，转而表达人类的HLA-DQ8分子。当这些小鼠通过多次灌胃致敏并持续摄入麸质后，其小肠会表现出与人类乳糜泻高度相似的特征，包括绒毛高度与隐窝深度比值（VH:CrD）下降，以及上皮内淋巴细胞（IEL）浸润增加。这为在活体动物中模拟HLA限制性的自身免疫反应提供了先决条件。

在确认ZED1227在肠道内能够有效抑制TG2活性后，研究团队对致敏小鼠进行了短期药物干预。结果显示，ZED1227不仅显著保护了十二指肠的绒毛结构，维持了VH:CrD比值，还抑制了CD3+上皮内淋巴细胞的病理性扩增。更深入的分析揭示，这种保护作用是广谱的：药物减少了肠道黏膜中包括CD138+浆细胞、CD45+白细胞、CD8+及CD4+ T细胞在内的多种炎性细胞亚群的浸润。这表明，阻断TG2对麸质的脱酰胺作用，能够从源头减少免疫激活信号，从而限制下游效应细胞的募集与组织损伤。

研究团队进一步检测了小鼠肠道黏膜中免疫调节相关基因的表达。在持续的麸质挑战下，ZED1227治疗组小鼠的十二指肠中，Tgfb1、Aldh1a2、Foxp3、Il-10等与调节性T细胞（Treg）分化和功能相关的转录本水平显著上调。同时，Socs2、Bag4、Cblb、Cblc、Rc3h1等编码免疫抑制和泛素化调控分子的基因也呈现高表达。研究团队注意到，这些基因的表达水平甚至超过了无麸质饮食的对照组小鼠，这提示ZED1227可能不仅阻断了炎症信号的启动，还主动触发了黏膜的免疫调节与收缩机制，以应对已存在的炎症环境。

这项研究最具说服力的证据，来自于跨物种的转录组数据比对。研究人员将小鼠模型中发现的9个标志性免疫调节基因，在ZED1227 2期临床试验（CEC-3）患者的十二指肠活检RNA测序数据中进行验证。结果显示，其中6个基因的表达变化在人类样本中同样可被稳健检测到。由CBLB、CBLC、SOCS2组成的核心3基因模块，以及包含BAG4、TGFB1等的6基因模块，其表达水平在ZED1227治疗后接受麸质挑战的患者活检中显著升高，并且与VH:CrD比值呈正相关。也就是说，这些基因表达越活跃，小肠黏膜的结构完整性越好。

借助单细胞RNA测序参考数据集，研究团队进一步将这一基因特征定位到肠道的淋巴细胞、Treg细胞和髓系细胞区室，为这些分子的细胞来源提供了证据。此外，通过对临床活检样本进行细胞组成反卷积分析，数据显示ZED1227治疗组患者肠道中，浆细胞、CD8+ T细胞和活化CD4+ T细胞的估算比例显著降低，而初始CD4+ T细胞的比例则相对升高，且浆细胞比例与VH:CrD比值呈负相关。这一系列发现表明，该人源化模型不仅能够模拟药物的组织学保护效果，更能捕捉到与人类治疗反应高度一致的免疫转录组特征。

这项研究的确立，意味着NOD-DQ8人源化小鼠模型不再只是一个用于探索发病机制的科研工具，它已具备作为乳糜泻特异性药物研发的转化平台的潜力。研究团队推测，ZG1227通过减少麸质肽-HLA复合物的数量与免疫原性，可能为免疫系统提供了一个重启调节性免疫应答的窗口，从而促进对麸质的耐受，而不仅仅是暂时的免疫抑制。

该模型的优势在于，它是在HLA许可的遗传背景下，通过多次免疫学“打击”诱导出的疾病状态，这与人类乳糜泻的发病过程更为接近。尽管研究中的小鼠致敏和给药周期相对较短，但它已成功复现了2期临床试验中的关键疗效终点，并揭示了跨物种共通的免疫调节通路。这为后续优先筛选乳糜泻候选药物、探究药物作用机制，提供了一座可靠且高效的前临床“桥梁”。