Cell子刊：大肠癌的神经基质互作，揭示双靶点治疗新策略 | 热心肠日报

研究团队最初的目标，是寻找一个能被胆碱能神经信号“唤醒”的分子。他们将目光投向NTN1（Netrin-1），一种在神经发育中负责引导轴突生长的关键蛋白。实验发现，当用神经递质乙酰胆碱处理CAFs时，NTN1是唯一被显著上调的轴突引导分子。通过分析人类结直肠癌组织的单细胞测序数据，团队锁定了NTN1的主要来源——正是高表达MFAP5、CTHRC1等标志物的肌成纤维细胞性CAFs。

这一发现具有颠覆性意义。此前，学界对NTN1在肿瘤中的认知多局限于上皮细胞，但该研究证实，在结直肠癌中，超过96%的NTN1+细胞表达CAF标志物PDGFRA。这意味着，是肿瘤基质中的“帮凶”成纤维细胞，而非癌细胞本身，成了释放这一促癌信号的源头。

研究团队随后精准描绘了这条信号通路。在CAFs中，乙酰胆碱通过结合其毒蕈碱受体3（CHRM3），激活Gq蛋白，引发细胞内钙离子浓度升高，进而抑制Hippo通路激酶LATS的活性。这导致下游的转录共激活因子YAP被去磷酸化而激活，活化的YAP入核，与TEAD转录因子结合，最终开启NTN1的转录。简而言之，神经信号直接“劫持”了CAFs的基因表达程序，迫使其大量分泌NTN1。

而这仅仅是环路的一半。被分泌出的NTN1并非仅仅是旁观者，它反过来强烈促进肿瘤内的胆碱能神经向内生长，形成更多神经末梢。这些新增的神经又释放更多乙酰胆碱，不仅维持了对CAFs的刺激，还直接作用于癌细胞本身的CHRM3受体，通过相同的CHRM3/Gq-YAP通路，直接加速癌细胞的增殖。

更令人警惕的是，CAFs分泌的NTN1对癌细胞发起了另一场“独立攻势”。研究发现，NTN1能够结合癌细胞表面的UNC5B受体，激活PI3K/AKT信号通路。这一通路不仅强力促进癌细胞生长，还诱导了上皮-间质转化（EMT）样程序，使癌细胞上调波形蛋白、TWIST1等间质标志物，并表现出更强的侵袭能力和肿瘤出芽特征——这是癌细胞获得转移潜能的关键一步。

在精巧的动物实验中，团队通过化学遗传学手段，特异性地激活了CAFs中的M3受体/Gq信号。结果令人震惊：这一操作不仅加速了小鼠肿瘤生长，更显著缩短了其生存期。而当他们在CAFs中敲除NTN1后，这种促癌效应被完全消除。这确凿地证明了，CAFs来源的NTN1是该神经-基质环路中不可或缺的效应分子。

既然环路如此清晰，打断它便成为治疗的关键。研究团队测试了两种策略：使用FDA已批准用于治疗膀胱过度活动症的药物达非那新（darifenacin）来阻断CHRM3，或是使用NTN1中和抗体NP137。在直肠原位移植瘤小鼠模型中，这两种干预均取得了显著疗效：不仅延长了小鼠的生存期，还抑制了肿瘤的生长。机制上，阻断CHRM3同时降低了癌细胞内的YAP活性和CAFs的NTN1表达，并减少了后续的AKT磷酸化与EMT特征；而靶向NTN1则直接削弱了这“双重打击”的第二波攻势，并反过来减少了肿瘤内的神经密度。

在人类样本中，研究团队通过对TCGA等多个数据库的分析，证实了高NTN1表达与结直肠癌患者更短的无进展生存期和总生存期显著相关，且NTN1高表达在预后最差的间质型（CMS4）亚型中尤为富集。这些临床数据为上述机制发现提供了坚实的转化医学基础。

这项研究揭示了一个核心洞见：肿瘤微环境中的神经和基质细胞并非孤立的“恶势力”，它们通过一个精密的自我放大环路，实现了对癌细胞生长的协同驱动。靶向这一环路的任一节点，都可能产生“一箭双雕”的效果，为结直肠癌的治疗开辟了充满希望的新方向。