在针对肿瘤的免疫治疗当中，CD47抗体已在许多晚期肿瘤患者开展多项临床研究，但是受到靶向副作用、物理屏障和免疫抑制性肿瘤微环境等影响。2024年12月浙大二院钱文斌/杭州一院王世兵团队在《Journal for Immunotherapy of Cancer》上发表标题为“Oncolytic vaccinia virus armed with anti-CD47 nanobody elicit potent antitumor effects on multiple tumor models via enhancing innate and adoptive immunity”的研究论文，该文章作者设计了编码抗CD47纳米抗体（OVV-aCD47nb）的新型溶瘤痘苗病毒（OVV-αCD47nb），促进了全身抗肿瘤免疫，显著增强先天性和过继性免疫。
靶向CD47的肿瘤免疫治疗
CD47是一种整合素相关蛋白，通常在多种正常细胞和肿瘤起始细胞上表达。在癌细胞中，CD47通过与信号转导调节蛋白α（SIRPα）结合，作为免疫逃避机制，从而诱导抑制性信号传导途径，使肿瘤细胞逃避巨噬细胞的吞噬作用。除此之外，CD47的过度表达与多种癌症中的不良临床结果相关，所以开发靶向CD47-SIRPα吞噬途径的治疗方法具有潜力。
新型工程化病毒：OVV-αCD47nb的构建及鉴定
OVV-αCD47nb是一种新型OVV，其修饰有高亲和力的抗CD47纳米抗体（αCD47nb），该纳米抗体是重链单克隆抗体的最小抗原结合结构域（VHH），并结合肿瘤细胞表面CD47。通过体外、体内实验证明了OVV-αCD47nb显著增强巨噬细胞的抗肿瘤功能、明显抑制多种生长小鼠肿瘤及延长小鼠生存期。
此外作者评估了OVV-αCD47nb的体内生物分布，使用qPCR分析正常和肿瘤组织中的病毒基因表达，病毒基因表达在注射后3天达到峰值，在治疗后10天还观察到病毒基因表达的第二个峰值，然后病毒基因拷贝数在第17天降至低水平或不可检测的水平。OVV-αCD47nb注射后14天，在正常组织（包括肝、肾和肺）中有极弱表达αCD47nb与肿瘤细胞表面的CD47抗原结合。
OVV-αCD47nb诱导肿瘤免疫微环境重建
在已有的报道中溶瘤病毒和CD47阻断都通过TME的重塑增强抗肿瘤功效，作者接下来进行scRNA-seq和CyTOF以表征所收集的肿瘤组织中的免疫景观和OVV-αCD47nb对其的潜在影响。
对上皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞、壁细胞、破骨细胞和红细胞进行鉴定。鉴定的免疫细胞群由单核吞噬细胞（MP）、中性粒细胞、T细胞和肥大细胞组成。整个免疫细胞数据集中的大多数细胞是MP，其在OVV-αCD47nb处理组中显著增加。
将MP细胞分成6个亚组进行分析，超过90%的细胞是巨噬细胞。可大致分为抗肿瘤M1表型和促肿瘤M2表型。OVV-αCD47nb处理组中M1相关基因的表达量明显高于对照组。
使用GO（GeneOntology）分析，得出涉及抗原加工和呈递的途径在OVV-αCD47nb处理组中特别丰富。
作者通过分析CyTOF数据的肿瘤内T细胞，发现OVV患者外周血中与OVV相关的3种T细胞亚群均显著降低，用OVV或OVV-αCD47nb处理导致PD-1+CD86lowCD8+T细胞和PD-1−Ki67−CD4+T细胞的数量显著减少。
OVV-αCD47nb治疗与表达CCR2（一种CCL2受体，对TAM的形成至关重要）的巨噬细胞减少相关。M1型巨噬细胞标志物iNOS和CD11b在OVV-αCD47nb中的表达高于其他标志物，经典的M2型巨噬细胞标志物41CD163表达较低，这与scRNA-seq的数据一致。
实验数据表明，瘤内注射OVV-αCD47nb可持续释放αCD47nb到肿瘤组织中，在临床前乳腺肿瘤和结肠肿瘤模型中，与CD47抗体相比，OVV-αCD47nb表现出更好的抗肿瘤疗效，并延长生存期，重塑了TME，显著增强了先天和过继免疫。
文章转载自iNature