通过氨水刺激大鼠咽部,诱导急性咽炎模型,用于研究急性咽炎的病理生理机制、药物治疗效果评估等相关实验。SPF级SD大鼠按性别体重随机分为对照组,模型组。将大鼠置于固定装置中,使其头部和颈部充分暴露,保持固定姿势,避免大鼠挣扎影响氨水刺激的准确性。用喉头喷雾器将一定浓度的稀释氨水(通常用生理盐水将浓氨水稀释至10%-15%)均匀地喷洒在大鼠咽部,每次喷洒量约为0.1-0.2ml,每天喷洒1-2次,连续刺激3-5天,以诱导急性咽炎。或以无菌棉签蘸取2.5%氨水涂抹于咽部(上午造模),每日1次,连续7d,其余各组动物均对照组采用同样方法于咽部涂抹生理盐水。给药期间每日对各组动物进行一般临床观察,包括精神状态、一般行为等生理状况,并于D4、D7称重。将大鼠置于单独的观察笼中,观察其吞咽频率和吞咽动作的顺畅程度。正常大鼠吞咽动作自然、频率相对稳定。在急性咽炎模型中,由于咽部炎症刺激,大鼠可能会出现频繁吞咽或吞咽困难的情况。可以使用摄像机记录大鼠在一定时间内(如30分钟)的行为,然后回放视频进行详细统计。计算单位时间内(每分钟)的吞咽次数,与正常大鼠的吞咽次数进行比较。同时,注意观察吞咽动作是否有停顿、延迟或伴有异常的头部动作(如伸展、扭动等),这些都可能提示吞咽困难。同样在安静的观察环境中,注意大鼠是否有咳嗽、呼吸急促或呼吸声异常等情况。咳嗽可以通过听声音和观察大鼠身体震动来判断。呼吸情况可以通过观察大鼠胸廓的起伏频率和幅度来评估。记录咳嗽的频率(每小时咳嗽次数)和呼吸频率(每分钟呼吸次数)。呼吸急促可以定义为呼吸频率明显高于正常范围(正常成年大鼠呼吸频率一般在70-110次/分钟),并结合观察大鼠是否有张口呼吸、鼻翼扇动等情况综合判断。咳嗽检测:于末次给药后1h,采用10%氨水溶液诱导大鼠咳嗽,采用诱咳引喘仪检测各组大鼠5min内咳嗽次数和咳嗽潜伏期。观察大鼠是否有用爪子搔抓咽部周围的行为。可以记录大鼠在一定观察时间内(如1小时)搔抓咽部的次数。由于搔抓行为可能受到其他因素干扰,需要排除大鼠正常梳理毛发等行为,重点关注其针对咽部区域的搔抓动作。计算单位时间内搔抓咽部的频率,作为衡量咽部不适感的一个指标。搔抓频率越高,可能表示咽部瘙痒或疼痛等不适感越强。观察大鼠在实验过程中的行为变化,如是否出现搔抓咽部、吞咽困难、咳嗽、呼吸急促等症状。记录这些症状出现的时间、频率和严重程度。例如,通过观察大鼠在一定时间内(如1小时)搔抓咽部的次数来衡量其咽部不适感。
病理观察指标:观察咽部黏膜的充血、水肿情况,炎症细胞浸润程度(如中性粒细胞、淋巴细胞等),以及黏膜上皮细胞的损伤程度(如脱落、变性等)。可以根据病理变化的程度进行半定量评分,例如,无炎症表现记为0分,轻度炎症(黏膜轻度充血、少量炎症细胞浸润)记为1分,中度炎症(黏膜充血、水肿,较多炎症细胞浸润)记为2分,重度炎症(黏膜明显充血、水肿,大量炎症细胞浸润,上皮细胞有脱落等)记为3分。 - 肖文喜,扶丽君,朱红霖,等.清热消炎宁对急性咽炎大鼠模型的抗炎作用[J].中南药学,2024,22(11):2899-2904.