作者 | 周露,卢惠雯,卢凌云
单位 | 广东省怀集县人民医院
梅毒属于一种临床上发病率较高的疾病,传播主要以梅毒病原体为渠道,经过淋巴系统及血液在人体中传播,当遭受到该种病毒的侵害之后,会严重损害患者的脏器组织[1]。
近年来,梅毒发病数呈逐年上升趋势,引起广泛关注,已成为全球性公共卫生问题。
由于梅毒病程的隐匿性、复杂性和多样性,随着梅毒感染率的不断升高,其误诊率(包括假阳性和假阴性)也在增加,尤其对于妊娠期女性及中老年患者。
误诊给临床诊疗、患者及其家庭带来一定的困扰,也给医务人员带来不必要的医患矛盾和纠纷。
患者,女性,15岁,因“发现外阴肿物5天,疼痛1天”收入我院治疗,甲苯胺红梅毒血清学试验(TRUST)为阳性(1:1)。
次日医生重开TRUST和TPPA,结果均为阴性,这引起了我们的高度重视,迅速拿出前后两天的标本重新离心后用批号不同的两瓶试剂进行复查;
检查标本无溶血和脂血等现象,重新检测的结果仍为第一天标本TRUST为阳性(1:1),第二天标本TRUST为阴性。这究竟是为什么呢?
1、是否为标本采集人员原因造成的假阳性呢?
为排除采集错误病人病人造成,经视频监控对比,被采血者均为同一人,我们将两份标本又重新进行TPPA和TP-Ab和ABO血型反定型检测,两日标本的TPPA和TP-Ab结果均为阴性,血型检测均为A型,已排除因错误采集不同采血者标本引起结果错误。
2、是否是生物学假阳性呢?
因影响TRUST结果的因素有很多,因病人妇科就诊,我们考虑是否存在凝血异常、用药或妊娠、肿瘤、血透、类风湿因子(RF)过高等因素导致病人结果异常;
于是我们查看病历和其他检验结果未见异常,其血清HCG(-),凝血四项结果正常,复查RF结果正常,考虑是否存在药物治疗而导致结果异常;
咨询医生得知在第一次抽血在未进行治疗的情况下抽的血,且患者在就医前也并未用药,由此可排除用药等因素的影响。
3、是否为检验过程中导致假阳性?
经查当天摇床、温湿度等正常,质控在控,当天除了以上两个标本为阳性(1:1)外,其他无异常,已排除因转速温湿度等原因引起的假阳性。
操作人员是同一个熟练掌握该操作的检测者,且前后两天均由她进行操作,两天结果一致,排除由检验人员引起的结果假阳性。
4、是否为技术性假阳性呢?
我们发现前后两天所用试管批号不一致,而第一天复查的两只管为同一批次试管,于是我们猜测会不会是由于不同批次的试管促凝剂存在差异造成的;
但前一天抽血所用的黄管(分离胶+促凝剂)均为同一个批次,无法直接排除,于是我们找出该病人同一时间抽的蓝管(枸橼酸钠抗凝剂)和紫管(EDTA抗凝剂)进行复查;
结果蓝管为弱阳性,紫管为阴性,排除枸橼酸钠抗凝剂和EDTA抗凝剂导致结果假阳性。
为验证猜想,经与肾内科沟通,我们使用同批次黄管10支抽取10位病人的血清标本进行检测,结果均为TRUST阳性(1:1),而使用其他批次黄管抽取的血清样本检测的结果均为阴性。
查阅相关文献和咨询试剂厂家后,我们认为可能是由于该批次的试管中的促凝剂成分与其他批次管存在差异而造成的假阳性结果,于是我们立马和临床沟通禁用了该批次的试管,并建议采用干燥管进行梅毒检测。
TRUST法所使用的试剂相对经济,并且操作简单,检测速度快,所用仪器简单,检测患者抗体滴度时无须借助特定的仪器设备,可将其作为梅毒疾病诊断中的重要观察指[2]。
但因其造成非特异性反应的因素多,易造成假阳性结果,敏感度低,易造成假阴性结果。
TRUST假阳性常见于:
1、技术性假阳性主要由真空采血管添加剂成分引起干扰检测结果。
1.1内源性干扰物质常见于血红素、胆红素和脂质。
1.2外源性干扰物质常见于标本处理过程中的添加物(抗凝剂、促凝剂等),以及采血过程中接触标本的物质(标本收集容器及塞子等)。
2、生物学假阳性是指与梅毒螺旋体感染无关的其他因素,也可使梅毒非特异性抗体实验呈阳性反应。
如急性或慢性疾病、自然组织损伤等;常见的疾病因素有系统性红斑狼疮、麻风病、疟疾、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、肿瘤、其他螺旋体疾病等;常见的生理因素有孕妇和老年等。[3]
含促凝剂+分离胶试管内含有促凝剂与分离胶两类添加成分。血液促凝剂是硅石粉、玻璃粉及其他促凝成分经特殊加工制成的粉剂[4];
离胶是由疏水有机化合物和分硅石粉组成的、具有触变性的黏液胶体,有助于血清与血细胞间的快速分离。在血液离心过程中分离胶可能会吸附某些分析物,或释放可能干扰检测的物质[5]。
由于不同方法及检测的灵敏度、特异度和实验条件存在差异,梅毒感染过程中形成的非特异性抗体以及特异性抗体含量也存在差异,不同检测结果之间存在差异,给检验人员带来一定难度。
为确保临床检验的准确度,防止出现假阴性或假阳性结果,要求检验人员严格按照有关规章制度进行操作,确保标本、试剂质量合格;
定期对检测仪器进行检查,在检验期间加强质控,选择全面、敏感、准确的联合检测法用于梅毒临床预防以及诊疗过程中,并结合患者的临床症状、病史等情况综合诊断,以避免不必要的医患矛盾。
参考文献
[1]许莹娟.疾控中心对梅毒的检测采用TRUST法与ELISA法 筛查诊断的价值[J].东方药膳,2020(3):30.
[2]刘冬梅,龙爱兰,颜娟娟.酶联免疫吸附测定法与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检测中的价值分析[J].现代诊断与治疗,2023,34(22):3428-3430.
[3] WS/T491-2024 梅毒非特异性抗体检测指南http://www.doc88.com/p-24587635951459.html
[4]瞿培培,肖春海,董志武.4种真空采血管对生化检测项目结果影响的评估[J].广州医科大学学报,2019,47(1):84-88.
[5]张伦军,丁晓琳,陈庆书,等.分离胶采血管对部分临床生化检验测定结果的影响[J].中华全科医学,2010,8(6):773,777.