新见解！西安交通大学李磊教授团队：改善肾癌患者免疫疗效的新方向

12月10日，西安交通大学李磊教授研究团队在期刊《Advanced Science》上发表了题为“CDC20-Mediated Selective Autophagy Degradation of PBRM1 Affects Immunotherapy for Renal Cell Carcinoma”的研究论文，本研究中，实验表明，PBRM1敲低可诱导M1型巨噬细胞极化和浸润，从而增强抗PD-1免疫疗法在RCC中的疗效。同时，CDC20催化PBRM1的K27泛素化，并通过p62介导的选择性自噬促进其降解。研究人员设计并构建了一个双环肽（PB1-p62），以靶向PBRM1和p62，从而促进PBRM1的降解。结果是，抗PD-1免疫疗法的疗效得到增强，在同种小鼠肿瘤模型中改善了总生存率。总的来说，这一发现为PB1-p62的临床应用提供了依据，并为增强RCC中野生型PBRM1患者免疫疗法的疗效提供了一种新的方法。

https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202412967

以往的研究已经证实，PBRM1的突变和功能丧失会促进免疫细胞的浸润，这可能会影响RCC的免疫治疗效果。因此，研究人员旨在评估野生型PBRM1对RCC免疫治疗的影响及其调节机制。研究人员首先使用shRNA构建了PBRM1敲低细胞系，并进行了RNA-seq分析。转录组数据富集分析表明，PBRM1敲低细胞中显著富集了免疫相关的信号通路。此外，来自RNA-seq分析的数据显示，在PBRM1敲低后，免疫相关通路的下游基因，尤其是多种趋化因子，显著上调。鉴于趋化因子在巨噬细胞招募和激活过程中发挥着关键作用，研究人员推测PBRM1敲低通过调节巨噬细胞招募发挥免疫调节作用。研究结果表明，PBRM1的缺失导致巨噬细胞浸润增强。此外，研究人员发现敲低Ccl7或Ccl17对巨噬细胞招募的影响微乎其微，而敲低Ccl5或Ccl20则显著降低了PBRM1缺失诱导的巨噬细胞招募。另外，与PBRM1敲除肿瘤细胞共培养后，M1型巨噬细胞标记物TNFα、IL12和IL1b的转录水平显著上调。而且，研究人员观察到Pbrm1 WT或敲除(KD) Renca异种移植瘤组织中存在浸润的巨噬细胞。这些结果表明，PBRM1敲除可在体内刺激M1型巨噬细胞的浸润和分化。

为了研究PBRM1敲低可能对ccRCC免疫治疗敏感性的影响，研究人员向BALB/c小鼠注射表达野生型或敲低Pbrm1的Renca细胞，并给予抗PD-1单克隆抗体治疗。研究结果表明，当与PD-1单克隆抗体联合治疗时，Pbrm1敲低可抑制肿瘤生长并改善生存率。为了研究巨噬细胞在PBRM1敲低介导的免疫治疗效果增强中的作用，研究人员利用氯膦酸盐脂质体清除肿瘤浸润的巨噬细胞，并评估肿瘤体积和负荷。结果表明，巨噬细胞的清除消除了PBRM1敲低在体内介导的增强免疫治疗效果，凸显了巨噬细胞招募在PBRM1介导的免疫逃避中的关键作用。同样地，沉默PBRM1显著增加了肿瘤浸润的CD8+ T淋巴细胞（TILs），这一效应可通过清除巨噬细胞逆转。此外，研究人员对RCC样本的微阵列进行了免疫组织化学染色，以评估iNOS（M1巨噬细胞的标志物）、CD8（CD8+ T细胞的标志物）和PBRM1的表达水平。研究结果表明，PBRM1表达与M1巨噬细胞细胞浸润之间存在显著的负相关（Rho = -0.3138，P = 0.0026），以及与CD8+ T细胞的浸润之间存在显著的负相关。这些结果表明，PBRM1抑制可促进M1型巨噬细胞向RCC的浸润，从而提高抗PD-1免疫疗法的效果并延长肿瘤携带小鼠的生存期。

总之，本研究发现CDC20是PBRM1溶酶体降解的调节因子，为控制PBRM1稳态的机制提供了新的见解。CDC20调节PBRM1的K27型泛素化，促进p62介导的选择性自噬降解PBRM1。因此，有针对性地设计融合肽以阻断降解过程，可以大大降低肾癌中PBRM1的水平并提高免疫治疗的效果。这将为改善PBRM1野生型患者的免疫疗效提供新的研究方向。