许代超/顾劲扬团队揭示启动细胞死亡的通用机制，带来炎症性疾病的潜在治疗靶点

▎药明康德内容团队编辑  

细胞程序性死亡是受基因调控启动的自杀保护机制，主要包括凋亡、程序性坏死、焦亡等。其中，凋亡由一系列caspases蛋白介导，焦亡主要由caspases和gasdermin蛋白介导，坏死则通常发生在caspases被抑制的情况下。由此可见，不同的程序性细胞死亡具有相同或类似的分子特征。不过，这些程序性死亡是否通过相同或类似的机制来启动呢？

日前，中国科学院上海有机化学研究所生物与化学交叉研究中心许代超课题组在《细胞》旗下的Molecular Cell杂志发表论文，报道了棕榈酰化修饰调控RIPK1激酶的激活，是程序性细胞死亡的一种广谱启动机制。

受体互作蛋白激酶RIPK1是肿瘤坏死因子（TNF）通路中的关键节点，可以通过其激酶功能诱导凋亡和/或程序性坏死。正常情况下，在多个细胞死亡检查点的“刹车”作用下，RIPK1激酶活性被抑制，避免了细胞死亡的发生。例如，一个检查点通过激酶的磷酸化依赖性失活，阻止了RIPK1依赖性细胞凋亡；第二个检查点则是通过caspase-8依赖性的RIPK1裂解，避免了细胞坏死性凋亡。相反，任何一个保护性检查点的缺失，都会导致“刹车”失灵，使RIPK1被激活，进而导致细胞死亡的发生。

已有的研究显示，多种人类炎症性和自身免疫性疾病与检查点缺失和RIPK1激活有关。因此，揭示RIPK1激活以及启动细胞死亡的机制有望为治疗炎症性疾病提供新的靶点。

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在这项研究中，作者发现在TNF刺激下，短时间内可诱导RIPK1发生棕榈酰化修饰。S-棕榈酰化是一种可逆的脂质修饰，其特点是在棕榈酰基转移酶的催化下，棕榈酸通过硫酯键共价连接到蛋白的半胱氨酸残基。棕榈酰化可赋予蛋白疏水特性，促进蛋白的向膜迁移或影响蛋白互作。根据论文，RIPK1棕榈酰化的修饰位点位于其激酶结构域内一个保守的半胱氨酸残基C257。

进一步研究发现，DHHC5是介导RIPK1棕榈酰化的主要棕榈酰基转移酶，且DHHC5的功能发挥依赖于RIPK1的K63泛素化对其进行的招募。

作者建立的模型详细阐明了细胞死亡检查点被破坏时，RIPK1介导的细胞死亡如何启动：①当细胞感应到TNF后，RIPK1被迅速招募到临近细胞膜区域的TNF受体复合物；在该复合物中，RIPK1在E3酶cIAP1/2的作用下发生K63连接的泛素化修饰。②这些K63泛素链会招募定位于细胞膜上的DHHC5，使之靠近RIPK1。③随后，DHHC5催化RIPK1激酶结构域上的棕榈酰化，增加激酶结构域的疏水特性，促进其同源相互作用。④在细胞死亡检查点受阻的情况下，上述过程可以增强RIPK1的反式自激活，最终导致下游的RIPK1介导的细胞死亡，包括凋亡和程序性坏死。

▲当TNF通路中的保护性检查点失活时，K63泛素化依赖的棕榈酰化促进RIPK1激活和启动细胞死亡的分子机制模式图（图片来源：研究团队提供）

最后，一系列小鼠实验表明DHHC5介导的RIPK1棕榈酰化是治疗炎症性疾病的潜在靶点。其中，阻断RIPK1棕榈酰化可以保护小鼠免受TNF诱导的致死性休克。此外，在患有代谢功能障碍相关的脂肪性肝病（MASH）小鼠体内，脂肪酸的累积促进了肝脏中DHHC5的扩增和RIPK1的棕榈酰化，使得RIPK1过度激活导致肝细胞死亡和肝损伤。肝细胞死亡是MASH发病机制的关键特征，可以导致进行性肝损伤和纤维化，从而增加终末期肝病的风险，因此这些发现强调了以RIPK1棕榈酰化为靶点开发MASH潜在治疗策略的重要性。

值得注意的是，许代超团队之前发表于Nature Cell Biology的研究还发现，gasdermin D的棕榈酰化是焦亡启动的必要条件。但棕榈酰化在不同细胞死亡类型中的作用方式有所不同。在焦亡中棕榈酰化促进gasdermin D的剪切激活和上膜成孔，而在凋亡和程序性坏死中，棕榈酰化促进RIPK1的反式自激活。综合这一系列的研究表明，棕榈酰化修饰是一种广谱的程序性细胞死亡启动机制。

中国科学院生物与化学交叉研究中心许代超研究员为本文通讯作者，华中科技大学同济医学院附属协和医院顾劲扬教授为共同通讯作者，中国科学院生物与化学交叉研究中心张娜博士为第一作者。中国科学院生物与化学交叉研究中心李婉津研究员、刘建平副研究员等人为该工作提供了宝贵的帮助。