华山细胞形态专栏内容将通过系列的病例报道，帮助大家了解细胞形态学检验在临床诊断中的作用。本系列内容由复旦大学附属华山医院检验医学科提供。
01
简要病史
患者，女性，56岁，因双眼视物黑影伴视力下降一年，当地医院以“葡萄膜炎”，强的松+晓悉治疗不明显，转入我院治疗。头颅MRI示：右侧小脑半球异常强化灶，淋巴瘤？入院后行玻璃体切割及活检术（见图1和图2），及腰穿检查（见图3）。 诊断原发中枢神经系统淋巴瘤，予MTX+Dex方案化疗后，顺利出院。
02
形态学检查
图1 玻璃体细胞学涂片
玻璃体细胞形态学：大量形态变异的幼稚样淋巴细胞增殖浸润,该类细胞胞体较大,胞浆量中等或丰富,色蓝,部分可见瘤状突起,胞核呈椭圆形或不规则型,核染色质疏松,可见1～3个核仁。偶见其核分裂型。此外还可见一些单核组织巨噬细胞及视网膜色素上皮细胞。
CD20染色
PAX-5染色
图2 玻璃体细胞学免疫组化
免疫化学染色：CD20（+）；CD3（-）；MUM-1（+）；PAX-5（部分+）；CD10（-）；CD19（+）；BCL-6(-)；BCL-2（少数+/-）CD79A（部分+）；CD79B(+)；MYD88（+）；Ki67：80%+，CK（-）。
玻璃体细胞学诊断意见：（玻璃体）见大量异常大B细胞增殖浸润，结合形态及免疫化学染色符合大B细胞淋巴瘤表现，提示：眼内B细胞淋巴瘤，请结合临床综合判断。
图3 脑脊液细胞学
脑脊液细胞学：有核细胞明显增生，分类以淋巴细胞增生为主，少量单核组织巨噬细胞，可见少量形态变异的幼稚样淋巴细胞，该类细胞胞体较大,胞浆量中等或丰富,色蓝,部分可见瘤状突起,胞核呈椭圆形或不规则型，核染色质疏松,可见1～3个核仁。偶见其核分裂型。
细胞学诊断意见：（脑脊液）淋巴细胞增生性反应，少量单核组织巨噬细胞，可见少量形态变异的幼稚样淋巴细胞，请结合临床综合判断。
03
眼内淋巴瘤简介
玻璃体液是一种透明的细胞外凝胶，由胶原、蛋白质、透明质酸和水组成，位于晶状体后面，充满于晶状体与视网膜之间，充满晶状体后面的空腔里，通常很少有细胞存在，它们主要在玻璃体皮层中，由Ballazs的透明细胞和神经胶质细胞组成。
原发性眼内淋巴瘤（PIOL），是原发性中枢神经系统淋巴瘤的一个亚型。根据肿瘤部位，包括玻璃体视网膜淋巴瘤、脉络膜淋巴瘤、虹膜淋巴瘤和睫状体淋巴瘤。大多数PIOL起源于B细胞，属于弥漫性大B细胞淋巴瘤，是一种大或中到大B细胞肿瘤(肿瘤细胞核大于或等于组织细胞核，或者比小淋巴细胞核大2倍)，呈现弥漫性生长。对PIOL进行细胞学诊断是临床医师面临的一大挑战。PIOL的症状具有非特异性，疾病初始往往被误诊为葡萄膜炎而导致治疗延迟，最终出现中枢神经系统受累。病理学检查及流式细胞术在房水、玻璃体、视网膜或脉络膜活组织病理检查中发现恶性淋巴瘤细胞是诊断PIOL的金标准。玻璃体活检取样后制备细胞蜡块，观察细胞形态，并进行免疫组化检测。单克隆性、B细胞标记(CD19、CD20或CD22)染色阳性并限制表达κ或λ、或T细胞标记(CD3、CD4)染色阳性，可以支持B或T细胞PVRL。
已知B细胞淋巴瘤产生白细胞介素IL-10，而炎症细胞产生IL-6。玻璃体中IL-10升高和(或)IL-10/IL-6比值>1.0高度提示B细胞PVRL。玻璃体中IL-10升高被认为是提示性的而非诊断性的生物标志物。
04
案例体会
眼内淋巴瘤，多为非何杰金淋巴瘤，病理以结外弥漫型大B细胞淋巴瘤为主，是一种高分化淋巴瘤，属于原发性中枢系统淋巴瘤(PCNSL)的一种。眼内淋巴瘤的症状具有非特异性，疾病初始往往被误诊为葡萄膜炎而导致治疗延迟，最终出现中枢神经系统受累。细胞学诊断是临床医师面临的一大挑战，玻璃体液细胞形态学结合免疫组化检测是诊断眼内淋巴瘤的金标准，细胞因子只能作为辅助性鉴别诊断依据。
参考文献：
1. Chen K, Li X, Wang D, Ma Y, Chen B, Wang Q, Ma J, Guan M. The diagnostic value of IL-10 and IL-6 level in vitreous fluid and aqueous humor for vitreoretinal lymphoma. Clinica Chimica Acta. 2021 Apr 1;515:21-6.
2. Chen K, Ma Y, Ding T, Zhang X, Chen B, Guan M. Effectiveness of digital PCR for MYD88L265P detection in vitreous fluid for primary central nervous system lymphoma diagnosis. Experimental and Therapeutic Medicine. 2020 Jul 1;20(1):301-8.
3. Shao J, Chen K, Li Q, Ma J, Ma Y, Lin Z, Kang H, Chen B. High Level of IL-10 in Cerebrospinal Fluid is Specific for Diagnosis of Primary Central Nervous System Lymphoma. Cancer Management and Research. 2020;12:6261.
病例编写：陈 锟
文章审核：关 明
编辑：徐少卿 审校：陈雪礼