作者 | 李子阳
指导老师 | 沈志明
单位 | 赣南医学院第一附属医院检验科
前 言
嗜异性抗体(Heterophil antibody,HA)是由已知的或未知的抗原物质刺激人体产生的一类具有足够滴度、能与多个物种的免疫球蛋白发生相对弱的结合的多重特异性的免疫球蛋白。
HA可通过与检测试剂盒中标记抗体结合引起检测结果异常[1-2]。由于检验人员缺乏对HA的认识，忽视了其对基于抗原抗体免疫测定法的干扰，使特异性和准确性得不到良好的保证。
最近在临床工作中碰到一例铁蛋白异常升高的病例，让我们不得不重视嗜异性抗体的干扰。
案例经过
近日我们接到临床反馈该患者没有铁累积的症状，并且血液科实验室铁染色阴性，而我们生化免疫室铁蛋白结果异常身高，临床表示不解，希望我们复查结果。
于是我们立刻查询该患者病例，患者女，两岁，因反复咳嗽1月余，发现颈部包块1天来我院就诊，诊断为系统性红斑狼疮伴有EB病毒感染。
检查结果，发现三天前日我们做出患者铁蛋白结果为1680 ng/mL如图1。
图1
三天后铁蛋白结果为15402 ng/mL，如图2。
图2
血液科实验室骨髓铁染色为阴性，如图3。
图3
在如此短的时间内患者血清铁蛋白变化如此之大，我们当时就有怀疑，可是之前就有升高并且工作忙忽视了。
现在临床有反馈，让我们立刻重视起来，启动异常结果处理流程，立即检查仪器状态，没有问题，检查当日质控在控，检查标本状态没有溶血没有脂血，并复查患者血清铁蛋白，结果相差不大。
对于异常高的结果我们首先想到的是稀释来消除非特异性干扰，但我们稀释后的结果依然很高，所有我们考虑是有嗜异性抗体干扰，采用聚乙二醇沉淀法来消除干扰，还原真相。
聚乙二醇（PEG）沉淀法是指在一定盐浓度条件下向溶液加入亲水性极强的聚乙二醇引起大分子溶质的凝聚沉淀的方法。常用于蛋白质、核酸、噬菌体等分离[3]。
本次实验利用PEG沉淀校准后血清铁蛋白结果为320 ng/mL，如图4所示，且本次实验对照组回收率为90%，校准结果可靠性较高。
图4
案例分析
铁蛋白是一种广泛存在的储铁蛋白，具有纳米尺寸的水合氧化铁内核和笼形结构的蛋白质外壳。铁蛋白是含20%铁的蛋白质。通常，存在于几乎所有身体组织尤其是肝细胞和网状内皮细胞内，作为铁储备。微量的血清铁蛋白反映了正常的铁储备。
骨髓小粒中有含铁血黄素称细胞外铁；细胞内也含有铁称细胞内铁，铁染色是其中三价铁离子与分子中蛋白质结合不牢，经处理后游离，可在酸性亚铁氰化钾溶液中产生普鲁士蓝反应而染色。缺铁时骨髓细胞外铁明显降低，甚至消失，铁粒幼细胞降低。在此案例中铁染色阴性说明患者体内缺铁。
查询资料得HA的产生通常是由于人类直接接触到动物、污染的食品、未经高温消毒的鲜奶和免疫疗法或者接种来源于动物血清或组织的疫苗产品后产生。研究发现，存在人体中的HA包括天然抗体和自身抗体，在健康人群中，约3%～15%体内含HA[2]。而案例中的嗜异性抗体应该主要考虑患者疾病引起的。
从图1、图2、图3可知，铁蛋白结果变化异常且与铁染色结果相冲突，经查询病历可知为一名系统性红斑狼疮的患者，EB病毒阳性，抗核抗体1:100阳性，存在自身抗体，可能为HA。
血清铁蛋白的检测使用双抗体夹心法，血清中的HA可与检测试剂中的抗体发生非特异性结合产生结果干扰，如图5所示。
图5
本次案例中结果假性偏高可为图5中B、D机制所致。经过PEG凝聚沉淀可减少HA带来的检测干扰，但不能完成消除干扰[3]。
小 结
HA的干扰可能伴随在每一个检测项目中，这就促使我们需要寻找一个有效的方法来消除它。尽管目前科学技术有了很大的进步，人们对其干扰机制有了深入的了解，但是到目前为止还没有一个单一的技术方法可以彻底地消除HA的干扰。
在日常工作中如果出现类似情况，若没有及时纠正，很容易误导临床治疗，严重时可能会发生医疗事故。
本案例探讨了自身免疫病患者血清中可能存在的HA对样本检测的干扰，但自身免疫病存在的检测干扰可能不只是HA的存在，可能还有其他机制，需要进一步研究分析。
【参考文献】
[1]黎锦,李一荣.内源性抗体对临床免疫检测的干扰及对策[J].中华检验医学杂志,2016,(11).
811-813.
[2]韦维.异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展[J].国际检验医学杂志,2010,(10).
[3]陈允,黄树芬,李波,等.聚乙二醇筛查法在高泌乳素血症中的临床研究[J].标记免疫分析与临床,2016,(3).255-258.
END
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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼